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1．取出ELISA試劑盒室溫平衡30min，取出血樣放至室溫。

2．配標(biāo)準(zhǔn)品：取150uL標(biāo)準(zhǔn)品參與150uL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液稀釋，順次稀釋5次。

3．加樣：分別于各反應(yīng)孔中參與標(biāo)準(zhǔn)品50uL，樣品40UL，標(biāo)準(zhǔn)品做復(fù)孔，樣品做3孔。

4．分別于樣品孔中參與10UL抗體。

5．標(biāo)準(zhǔn)品和樣品孔中分別參與50uL鏈酶親和素-HRP，蓋上封板膜,悄然轟動(dòng)混勻，37℃溫育60min。
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6．配洗刷液：將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

7．洗刷：留神揭開封板膜，棄去液體，甩干，每孔加200uL洗刷液，靜置30s后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

8．ELISA試劑盒顯色：每孔先參與顯色劑A 50uL，再加顯色劑B 50uL，悄然轟動(dòng)混勻，37℃避光顯色6min。

9． 中止：每孔參與中止液50uL，中止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色當(dāng)即轉(zhuǎn)為）。

10．測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度。測(cè)定應(yīng)在加中止液10min之內(nèi)進(jìn)行。

11．保存效果，收拾桌面。

12．分析處理數(shù)據(jù)